产品名称：NHEK，正常人表皮角质形成细胞

种属：人

来源：表皮；角质形成层

培养基：DMEM

状态：贴壁

NHEK，正常人表皮角质形成细胞培养实验室的具体要求主要取决于开展的研究类型；例如：专业从事研究的哺乳动物细胞培养实验室与从事蛋白质表达工作的昆虫细胞培养实验室的需求相差甚大。但是，所有细胞培养实验室都要求内部没有致病性微生物存在(即：无菌)，并且均有一些相同的细胞培养必需基本设备。

此部分列出了大多数细胞培养实验室共有的一些设备和用品，以及可使工作更为高效、准确或者可提高检测和分析范围的实用性设备。请注意此列表并非无所不包；任何细胞培养实验室的需求均取决于其所开展的工作类型。

基本设备：

(1)细胞培养通风橱  (即：层流通风橱或生物安全柜)

(2)培养箱  (推荐使用湿式二氧化碳培养箱)

(3)水浴锅 

(4)离心机 

(5)冰箱和冰柜  (-20°C)

(6)细胞计数器  (例如：Countess® 自动细胞计数器或血球计数器)

(7)倒置显微镜 

(8)液氮  (N 2)  冷冻柜或冻存容器 

(9)灭菌器  (即：高压灭菌器)

扩增设备：

(1)抽吸泵  (蠕动泵或真空泵)

(2)pH  计

(3)共聚焦显微镜

(4)流式细胞仪

其他用品：

(1)细胞培养容器  (例如：培养瓶、培养皿、滚瓶、多孔板)

(2)吸管和移液器 

(3)注射器和针头 

(4)废物容器 

(5)培养基、血清和试剂 

(6)细胞

NHEK，正常人表皮角质形成细胞良好的个人卫生

操作细胞培养物前后应洗手。穿戴个人防护设备不仅可保护您免受危险品污染，还可降低皮屑以及衣服上污物和灰尘污染培养物的可能。

无菌试剂和培养基

商品化试剂和培养基经过严格的质量控制以确保其无菌性，但是在操作过程中这些产品可能被污染。应遵循以下无菌操作原则以免污染。必须采用适当的灭菌方法  (例如：高压蒸汽、无菌过滤)  对实验室中配制的所有试剂、培养基和溶液进行灭菌。

无菌操作

(1)必须用 70%  乙醇擦拭双手和工作区域。

(2)在将容器、培养瓶、培养板和培养皿放入细胞培养通风橱之前，必须用 70%  乙醇擦拭其外部。

(3)不要从试剂瓶或培养瓶中直接倾倒培养基和试剂。

(4)使用无菌玻璃吸管或一次性塑料吸管和移液器操作液体；每支吸管只能使用一次，以免交叉污染。使用时方可打开无菌吸管的包装。吸管应始终位于工作区域内。

(5)试剂瓶和培养瓶用后必须盖上，用胶带将多孔板密封起来或者将其放入重复密封袋中，以免微生物和空气污染物进入，污染培养物。

(6)无菌培养瓶、试剂瓶、培养皿等物品使用时方可揭开盖子，不得将其开放暴露于环境中。操作完成后尽快盖上盖子。

(7)取下盖子时应将盖子开口朝下放在工作台面上。

(8)必须使用无菌玻璃器皿和其他设备。

(9)进行无菌操作时不要说话、唱歌或者吹口哨。

(10)尽快完成实验，以尽量避免污染。

NHEK，正常人表皮角质形成细胞的*温度主要取决于细胞供体的体温，此外也受到解剖部位体温差异的影响(例如：皮肤温度低于骨骼肌的温度)。与温度过低相比，细胞培养时温度过高是更为严重的问题；因此，往往将培养箱的温度设定为略低于*温度。

(1)大多数人和哺乳动物细胞系在36°C至37°C下具有*生长状态。

(2)昆虫细胞在27°C下具有*生长状态；在低于27°C以及27°C至30°C范围内，细胞生长较慢。温度超过30°C时，昆虫细胞活力降低，即使温度降至27°C，细胞活力也无法恢复。

(3)禽类细胞系在38 .5°C时具有*生长状态。虽然此类细胞也可在37℃下培养，但其生长速度会变慢。

(4)来源于冷血动物(例如：两栖动物、冷水鱼)的细胞系可耐受很宽的温度范围(15°C-26°C)。

请注意每种细胞的培养条件均有所不同。偏离某种细胞所需的培养条件会导致细胞表型异常，甚至培养完全失败。因此，我们建议您应熟悉自己使用的细胞系，实验中严格遵守所有产品附带的操作说明。

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